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B95-8絨猴EBV轉化的白細胞

更新時間：2020-06-22　點擊量：2458

細胞信息表

細胞名稱 B95-8絨猴EBV轉化的白細胞

種屬絨猴

組織來源外周血

生長狀態(tài) 懸浮細胞

培養(yǎng)條件培養(yǎng)基類型：RPMI1640培養(yǎng)基

FBS:10%

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%

傳代方法：收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮

培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代方法：

1棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸

后放入37℃培養(yǎng)箱內，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變

圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，

吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉移到離心管內，1000rpm， 5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

凍存方法：

70%*培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。

儲存：液氮中長期保存。

1觀察細胞hao在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。

2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3收到細胞后若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請在一周內與我們聯系。